Sanger测序

起步于承担人类基因组计划和多项全基因组测序重大项目,诺赛基因的DNA测序平台是您的研究工作最可信赖的技术支撑和合作伙伴。世界一流的仪器设备与近十年对外测序服务经验的完美结合,辅助以标准化的流程和全程监控的质量保障和质量控制系统,诺赛基因的大规模、高通量、自动化的DNA测序平台致力于为国内和国外客户提供高质量、高性价比、高效的测序服务。

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样本要求
样品类型浓度体积备注
已知浓度的未纯化的PCR产物大于50ng/ul≥30ul如果目标片段较大,需要相应增加样品体积
未知浓度的未纯化的PCR产物3ul电泳检测应为明亮的一条带≥50ul
纯化的PCR产物≥50ng/ul,条带务必单一,特异≥10ul请溶于不含DNA酶的双蒸水中,勿溶于TE,建议客户送原液来诺赛纯化
提纯的质粒≥100ng/ul≥10ul
大肠杆菌1ml新鲜过夜培养菌液,穿刺菌,平板菌,甘油菌,沉淀菌体或5ml成熟菌液,菌体所含质粒应为高拷贝,对于低拷贝表达载体(如pET系列),建议提供提纯的质粒
单链DNA样品≥100ng/ul10ul
BAC末端测序样品≥500ng/ul
不少于2ugDNA
噬菌体拒绝接收噬菌体上清以及被噬菌体污染的菌液,只接收提纯的噬菌体DNA
大量测序样品多于48个样品,建议96孔板送样
自备的测序引物要求
1. PAGE纯化测序引物。
2. 引物浓度不低于5 pmol/ul,不少于10ul。样品较多时,可以每个反应需5 pmol/ul引物1ul计算所需引物量。
3. 引物Tm=50~60℃,18~25mer,GC含量40~60%。无4个以上连续GGGG,尤其3’端。
4. 勿使用有荧光标记或其它标记的引物。
5. 随机引物,混合引物不能用作测序。
6. 一般,引物保质期限为一年。
送样注意事项
1.  为了对样品进行及时有效地处理,请详细填写DNA测序样品的相关内容和测序要求。
2.  我公司提供Amp,Kan,Cm,Tc四种抗生素和LB、2YT两种培养基以及37℃培养温度。如果您的细菌样品需要其他抗生素,请  ​随样品一起备齐并标明工作浓度,特殊培养基及特殊培养条件请注明。
3.  样品名命名规则:由于有些符号系统不识别,会影响测序结果的发送,建议您用字母、数字和“-”组成,系统会自动将特殊字符(\,/,:,*,?,>,>,|)等转换成“_”,请注意!

4.  E-MAIL:为使测序结果顺利发送到您的邮箱, 建议采用容量大的163或126信箱,邮箱地址请用大写字母填写, 同时注意区分数字0和字母O、数字1和字母I、数字2和字母Z、横杠和下划线等易混淆的字体,字迹清楚!

5.  订单填写注意事项
   完整填写《诺赛基因DNA测序登记单》
   注意样本与登记单信息一致
   避免样本渗漏,或交叉污染
   诺赛提供大量通用测序引物
   GC含量高,发卡序列,重复序列,请标注
测序结果说明

1.  接收样品当天不计算在内,12个工作日内发送测序结果。对于送样时为甘油菌、刚接种的菌液以及含拷贝数低和大的质粒载体的菌液样品,3个工作日内发送测序结果。对于返工的反应,以发送结果当天为第一天,三日内发送返工测序结果。
2.  测序结果我们以压缩文件Zip形式发送,内含测序结果和《DNA测序报告》,其中:

Aab1为后缀的文件为测序图谱,请使用CHROMAS, BIOEDIT, DNAMAN 等软件打开。

B Seq为后缀的文件为碱基序列,请使用NOTEPAD(记事本)或者DNAStar等软件打开。

C.DNA测序报告》为HTML文件,请使用Internet Explorer等网络浏览器打开,该报告包含样品测序的详细信息,同时作为我公司与您对测序服务交流的重要书面材料,请认真查看。

3.  如需对您的样品测序进行实时跟踪和结果下载请登陆http://61.49.28.136/web向我公司查询用户名和密码,即可进入页面进行测序跟踪和结果下载。

公司郑重承诺
1. 公司对客户的样品情况和测序结果严格保守秘密,客户持有数据所有权。
2. 在没有特殊申明的情况下,客户样品及引物免费保留一个月,测序数据(电子版)免费保留一年。

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